質(zhì)譜鑒定不成功主要可以分為兩類,一類是質(zhì)譜效果不好,一類是沒有可參考的蛋白數(shù)據(jù)庫,質(zhì)譜效果不好的原因又可以細(xì)分為蛋白點(diǎn)太淡以至于蛋白含量過低、蛋白點(diǎn)取得太小不利于操作、雖然經(jīng)過雙向電泳分離但卻是某幾個(gè)蛋白的混合蛋白點(diǎn)、蛋白酶解及質(zhì)譜操作失誤等,要避免這些因素需要盡量取顏色深一些的蛋白點(diǎn),并且取的蛋白點(diǎn)面積需要適當(dāng)大一些(對于某些很小但很清晰的蛋白點(diǎn),取點(diǎn)的時(shí)候可是適當(dāng)選擇孔徑大一些的槍頭,把邊上空白處適當(dāng)取到一些也不要緊),避免取點(diǎn)可能混合的蛋白點(diǎn),具備豐富的酶解質(zhì)譜操作經(jīng)驗(yàn)。而由于沒有可參考的數(shù)據(jù)庫導(dǎo)致的鑒定效果較差,可以通過更換范圍更大的數(shù)據(jù)庫、采用EST數(shù)據(jù)庫以及根據(jù)單個(gè)物種的蛋白數(shù)據(jù)庫構(gòu)建本地質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫的方式得到解決。
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