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IP / Pull down Beads標簽抗體分子互作試劑盒基因表達產(chǎn)品內(nèi)參抗體分子互作單品
RNA pull-down試劑盒
產(chǎn)品名稱
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生物素RNA Pull down試劑盒簡介


RNA pull-down是檢測RNA及其結合蛋白(RNA binding protein,RBP)之間相互作用的主要實驗手段之一。生物素-RNA pull down試劑盒利用體外轉錄的生物素標記RNA來模擬天然RNA分子,作為探針,與樣本裂解液孵育,探針與裂解液中的蛋白形成RNA-蛋白質(zhì)復合物;通過鏈霉親和素磁珠與生物素之間的強親和力,特異性捕獲生物素標記的RNA,從而實現(xiàn)RNA結合蛋白(RBPs)的捕獲富集;之后可以采用Western Blot技術檢測特定蛋白,也可以采用質(zhì)譜(LC-MS/MS)技術鑒定未知蛋白。



生物素RNA pulldown試劑盒應用


RNA結合蛋白(RBPs)是一類功能強大而廣泛的調(diào)節(jié)因子,約占細胞編碼的所有蛋白的5%-10%。除了少數(shù)RNA以核酶形式單獨發(fā)揮功能,大部分RNA通過與蛋白結合形成RNA-蛋白復合物來發(fā)揮作用。一方面,RBP參與RNA調(diào)控,另一方面,RNA也會調(diào)控RBPs。以下列舉了可應用F2-RNA pull down試劑盒的幾個研究方向:

1. RNA活性、轉運、定位調(diào)控;

2. RNA穩(wěn)定性、翻譯和降解;

3. RNA合成、可變剪切;

4. RNA修飾;

5. RBPs的活性、定位或與其他蛋白質(zhì)相互作用。



生物素RNA pulldown試劑盒組分


 試劑名稱 體積12 Tests 體積24  Tests 保存條件
 鏈霉親和素磁珠500 μL1 mL 4 ℃
 裂解緩沖液7 mL14 mL 4 ℃
 NT2緩沖液 16 mL 32 mL 4 ℃
 RNA結構緩沖液 650 μL 1.3 mL 4 ℃
 漂洗液 32 mL 64 mL 4 ℃
 洗脫緩沖液 650 μL 1.3 mL -20 ℃
蛋白酶抑制劑230 μL460 μL -20 ℃
RNase抑制劑65 μL130 μL -20 ℃





生物素RNA pull down試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢


1、調(diào)取效率高:鏈霉親和素磁珠和生物素具有強大的親和力,且磁珠背景噪音低,特異性強。

2、適用范圍廣:優(yōu)化的裂解液配方適用于動物、植物、真菌等各類型細胞或組織樣本。

3、適配下游檢測:競爭洗脫效率高,蛋白無需變性,更有利于蛋白的質(zhì)譜檢測;

4、技術應用成熟、廣泛。

RNA pulldown試劑盒.png




生物素RNA pulldown試劑盒使用流程簡述



1. 擴增帶有T7啟動子的目標序列,并以此為模板制備生物素標記的RNA探針;

2. 鏈霉親和素磁珠與目標RNA探針孵育;

3. 與待測蛋白液孵育,調(diào)取目標RNA的結合蛋白。




生物素RNA pull-down試劑盒使用案例


輝駿生物生物素RNA pull-down試劑盒使用案例

RNA pull down預測結合蛋白的western-blot檢測圖




RNA pulldown試劑盒—客戶文獻


1.  The HOXD9-mediated PAXIP1-AS1 regulates gastric cancer progression through PABPC1/PAK1 modulation. 2023. Cell Death & Disease. 1區(qū), IF=9. 

2. He S.W. et al: AR-induced long non-coding RNA LINC01503 facilitates proliferation and metastasis via the SFPQ-FOSL1 axis in nasopharyngeal carcinoma. 2020. Oncogene. 1區(qū), IF=8.756. 

3. He S.W. et al: LINC00173 facilitates tumor progression by stimulating RAB1B‐mediated PA2G4 and SDF4 secretion in nasopharyngeal carcinoma. 2023. Molecular Oncology. 2區(qū), IF=7.449.


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