1. iTRAQ是一級質(zhì)譜定性,二級質(zhì)譜定量,實(shí)際操作中,一級質(zhì)譜中m/z相近的一些母離子,而不是嚴(yán)格的同一m/z的母離子,被篩選進(jìn)入質(zhì)量分析器2進(jìn)行二級質(zhì)譜鑒定,定量的肽段與定性的肽段不是一一對應(yīng)的關(guān)系,故造成iTRAQ定量誤差大。然而,SILAC是一級質(zhì)譜定量,二級質(zhì)譜定性,定量的肽段就是對應(yīng)的定性的肽段,定量更加精確。
2. iTRAQ在母離子進(jìn)入質(zhì)量分析器2前要進(jìn)行母離子破碎,但是母離子破碎的比率達(dá)不到100%,造成報(bào)告離子的峰強(qiáng)偏低,定量存在誤差。
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