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Von Hippel-Lindau綜合征簡(jiǎn)稱VHL綜合征，又稱VHL病，希佩爾-林道綜合征、林島綜合征，是一種常染色體顯性遺傳病。VHL病患者表現(xiàn)為多器官腫瘤綜合征。文獻(xiàn)報(bào)道VHL綜合征的發(fā)病率為1/91000～1/36000，患者60歲時(shí)外顯率可達(dá)90%。

VHL綜合征是由VHL基因的突變引起的，VHL基因是一種抑癌基因，其位于染色體3q25-26，編碼含有213氨基酸的VHL蛋白。VHL蛋白作為E3泛素連接酶復(fù)合體的組成成分，通過(guò)泛素化途徑參與缺氧誘導(dǎo)因子HIF的降解。VHL基因突變時(shí)，VHL蛋白功能喪失，導(dǎo)致HIF不能被正常降解而累積，引起下游分子(如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、血小板源性生長(zhǎng)因子等)表達(dá)升高而導(dǎo)致多腫瘤的發(fā)生。另外，研究發(fā)現(xiàn)攜帶VHL突變的雄性小鼠會(huì)出現(xiàn)睪丸發(fā)育異常、精子數(shù)量減少、精子發(fā)生受損和不育，以及多器官的血管化改變等無(wú)功能pVHL的常見(jiàn)標(biāo)志。

近日，來(lái)自意大利帕多瓦大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)于cancers雜志上發(fā)表了一篇題為“Characterization of the pVHL Interactome in Human Testis Using High-Throughput Library Screening”的文章，他們使用酵母雙雜交篩選技術(shù)，研究了人類(lèi)睪丸中pVHL30的相互作用組，發(fā)現(xiàn)了與pVHL30互作的蛋白有61個(gè)，其中6個(gè)為之前已報(bào)道的，55個(gè)為新發(fā)現(xiàn)的。包括參與相關(guān)細(xì)胞通路的蛋白，如細(xì)胞周期調(diào)控、DNA損傷修復(fù)、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞骨架調(diào)控，其中多種蛋白質(zhì)直接參與精子發(fā)生、生殖代謝和癌癥。

通過(guò)對(duì)篩選到的陽(yáng)性克隆進(jìn)行深入的生物信息學(xué)分析，研究者從新鑒定到的pVHL相互作用因子中發(fā)現(xiàn)確定了多個(gè)pVHL特異性結(jié)合基序，并證明了在人類(lèi)癌癥中體細(xì)胞突變位點(diǎn)含有pVHL特異性結(jié)合基序。這些發(fā)現(xiàn)表明，pVHL除了參與癌癥形成，也可能在人類(lèi)正常性腺發(fā)育過(guò)程中起關(guān)鍵作用。

陽(yáng)性克隆鑒定和生長(zhǎng)結(jié)果展示

陽(yáng)性克隆注釋分析

癌癥中突變蛋白包含本研究新發(fā)現(xiàn)的pVHL互作子

蛋白組/代謝組實(shí)驗(yàn)

? iTRAQ 定量蛋白質(zhì)組學(xué)

? Label Free 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)

? LC-MS/MS 蛋白質(zhì)譜鑒定

? DIA 全息掃描定量蛋白質(zhì)
? 廣泛靶向代謝組學(xué)

蛋白/核酸相互作用實(shí)驗(yàn)

? GST pull down

? RNA pull down

? DNA pull down

? Co-IP 免疫共沉淀

? TAP-MS串聯(lián)親和純化

分子細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

? 基因調(diào)取/合成 (cDNA克隆)

?熒光定量PCR (qPCR)

? 載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)服務(wù)

?miRNA靶基因驗(yàn)證
? 慢病毒包裝

科研產(chǎn)品

? 哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體

? 人cDNA克隆庫(kù)

? 慢病毒表達(dá)載體

? 慢病毒干擾載體

抗體工程服務(wù)

? 單克隆抗體測(cè)序

? 抗體從頭測(cè)序

? 抗體表達(dá)服務(wù)

? 重組抗體表達(dá)

實(shí)驗(yàn)試劑盒

? RNA pull down 試劑盒

? GST pull down 試劑盒

? COIP 試劑盒

? Flag 試劑盒